Активация хемилюминесценции сыворотки крови различными люминофорами

Сыворотка крови является основным субстратом исследования для диагностики в медицине и ветеринарии. Регистрировали спонтанную хемилюминесценцию сыворотки крови и активированную различными флуоресцентными красителями с целью повышения чувствительности метода, за счет увеличения квантового выхода излучения. В качестве активаторов были использованы: ализариновый красный, конго красный, фуксин кислый, родамин Ж, метиленовый голубой, акридиновый оранжевый. Во всех приведенных выше случаях данные флуорохромы не оказывали активирующего действия на интенсивность хемилюминесценции сыворотки крови, а при высоких концентрациях являлись тушителями биохемилюминесценции исследуемом спектральном, диапазоне. Это можно объяснить тем, что данные флуорохромы ослабляют излучение первичных возбужденных продуктов, перехватывая энергию их электронного возбуждения, а максимум их собственной флуоресценции лежит вне области чувствительности ФЭУ-140. С другой стороны, возможно, что они выступают как классические тушители спонтанного свечения. Введение родамина Ж в качестве акцептора энергии . было более оправданным, так как он является липидным зондом. Увеличение сигнала было 3,2 раза по сравнению со спонтанным свечением. Наибольшее усиление давал акридиновый оранжевый. Максимум интенсивности наступал через 5-7 минут после введения активатора в сыворотку крови и превышал спонтанное свечение в 18,6 раза. С увеличением концентрации акридинового оранжевого (АО) происходило и линейное увеличение интенсивности свечения. В результате проведенных экспериментов установили, что линейная зависимость максимальных значений спонтанной БХЛ сыворотки крови от концентрации АО сохраняется в диапазоне температур от 35-45°С. Этот эффект подтверждает возможность использования максимальной амплитуды как одного из критериев степени усиления спонтанного свечения активаторами.